寬PH色譜柱是一款耐溶劑型手性柱,硅膠表面共價鍵合有直鏈淀粉-三。具有很好溶劑耐受性,所有適用于HPLC的溶劑均可作為流動相或者樣品溶媒使用。因此它可以用于各種分析條件,不必擔心因溶劑使用不當而造成的劣化或者損壞。同時也進一步擴大了分離條件的選擇范圍,能夠分離更多的手性化合物。
1.避免過高的柱壓
雖然寬PH色譜柱能耐受的壓力可達6000psi(磅/平方英寸),但過高及過大的壓力變化均會縮短色譜柱的壽命,避免的方法是:
(1)柱壓過高時,盡可能采用較小的流速,以不超過柱最大允許壓力的一半為宜。
(2)當流速較大時,應采取流速梯度的辦法使流速分步到位。
(3)使用手動進樣閥時,進樣閥的切換要盡可能的快。否則
超過20%的壓力沖擊會很快使柱報廢。當使用多柱聯(lián)用時,柱切換要避免在高壓下進行。
2.注意溫度和酸堿度
一般以硅膠為基質的色譜柱最高使用溫度不超過60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動相pH接近使用限度時,更應降低使用溫度。溫度過高會加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而,使填料性質改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。如必須要在特別的pH條件下使用寬PH色譜柱時,可通過以下方法避免柱損害:
(1)在泵和進樣閥之間加裝預柱(飽和柱)來飽和流動相;
(2)降低使用溫度;
(3)檢驗完畢后立即用與所使用的流動相互相混溶的“溫和溶劑”*清洗。